Entwécklung vun enger indirekter ELISA Method fir Detektioun vu Schwäin akuter Diarrhoe Syndrom Coronavirus IgG Antikörper baséiert op rekombinant Spike Protein

Porcine Acute Diarrhea Syndrome Coronavirus (SADS-CoV) ass en nei entdeckten porcine enteresche pathogene Coronavirus deen Waasserdiarrho bei Neigebuerene Pigelen verursaache kann a bedeitend wirtschaftlech Verloschter fir d'Schwäinindustrie verursaachen.Am Moment gëtt et keng gëeegent serologesch Method fir d'Effizienz vun der SADS-CoV Infektioun an der Impfung ze evaluéieren, sou datt et en dréngende Bedierfnes ass fir en effektiven Enzym-verbonne Immunosorbent Assay (ELISA) ze benotzen fir dësen Defizit ze kompenséieren.Hei ass e rekombinante Plasmid, deen SADS-CoV Spike (S) Protein ausdréckt, fusionéiert mat mënschlecht IgG Fc Domain konstruéiert fir rekombinant Baculovirus ze produzéieren an an HEK 293F Zellen ausgedréckt.De S-Fc Protein gëtt mat Protein G Harz gereinegt an behält d'Reaktivitéit mat anti-mënschlechen Fc an Anti-SADS-CoV Antikörper.Duerno gouf S-Fc Protein benotzt fir indirekt ELISA (S-iELISA) z'entwéckelen an d'Reaktiounsbedéngungen vu S-iELISA ze optimiséieren.Als Resultat, duerch d'Analyse vum OD450nm Wäert vun 40 SADS-CoV negativ Sera bestätegt duerch Immunofluoreszenz Assay (IFA) a Western Blotting, gouf den Ofschnëttwäert als 0,3711 bestëmmt.De Variatiounskoeffizient (CV) vun de 6 SADS-CoV positiven Sera bannent an tëscht Lafen vu S-iELISA waren all manner wéi 10%.De Cross-Reactivity Test huet gewisen datt S-iELISA keng Kräizreaktivitéit mat anere Porcine Virus Sera huet.Zousätzlech, baséiert op der Detektioun vun 111 klineschen Serum Echantillon, war de globale Zoufallsquote vun IFA a S-iELISA 97,3%.De Virusneutraliséierungstest mat 7 verschiddene OD450nm Wäerter vum Serum huet gewisen datt den OD450nm Wäert deen duerch S-iELISA festgestallt gouf positiv mam Virusneutraliséierungstest korreléiert war.Endlech gouf S-iELISA op 300 Schwäin Bauerenhaff Serum Echantillon gesuergt.Kommerziell Kits vun anere Porcine Enteroviren hunn gewisen datt d'IgG positiv Tauxe vu SADS-CoV, TGEV, PDCoV a PEDV 81.7%, 54%, respektiv 65.3% waren., 6%, respektiv.D'Resultater weisen datt d'S-iELISA spezifesch, sensibel a reproduzéierbar ass, a ka benotzt ginn fir SADS-CoV Infektioun an der Schweinindustrie z'entdecken.Dësen Artikel ass vum Copyright geschützt.all Rechter reservéiert.


Post Zäit: Jun-22-2021